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分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的有毒試劑,你知道多少?一起來(lái)看看吧一、DMSO(二甲基亞砜)DMSO,用途廣泛,用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶于水又溶于有機(jī)溶劑的極為重要的非質(zhì)子極性溶劑。對(duì)皮膚有極qiang的滲透性,有助于藥物向人體滲透。也可作為農(nóng)藥的添加劑。也是一種十分重要的化學(xué)試劑。DMSO也是一種滲透性保護(hù)劑,能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn),減少冰晶的形成,減輕自由基對(duì)細(xì)胞損害,改變生物膜對(duì)電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。但是研究表明,DMSO存在...
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類(lèi)器是一種類(lèi)似器官但又不是器官的3D細(xì)胞團(tuán)結(jié)構(gòu)。通過(guò)在體外培養(yǎng)胚胎或成體干細(xì)胞,讓其增殖分化形成具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能的類(lèi)似于器官的3D細(xì)胞團(tuán)結(jié)構(gòu)。這些細(xì)胞結(jié)構(gòu)雖然不是真正意義上的人類(lèi)器官,但能在某些結(jié)構(gòu)和功能上模擬真實(shí)器官,因此,把這些微型人造器官命名為:類(lèi)器官(organoids)。類(lèi)器官技術(shù)都有哪些應(yīng)用?讓我們一起來(lái)看看吧!一、基因編輯技術(shù)在類(lèi)器官研究中的應(yīng)用CRISPR-Cas9是細(xì)菌和古細(xì)菌在長(zhǎng)期演化過(guò)程中形成的一種適應(yīng)性免疫防御,可用來(lái)對(duì)抗入侵的病毒及外源DNA。...
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測(cè)序,測(cè)的是DNA的序列,也就是測(cè)定DNA中脫氧核糖核苷酸的排列順序,它是將DNA化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)橛?jì)算機(jī)可處理的數(shù)字信號(hào)的一個(gè)過(guò)程,我們能從這些經(jīng)過(guò)科學(xué)計(jì)算得出的數(shù)字信號(hào)中找尋到生命之間的奧秘。根據(jù)測(cè)序技術(shù)出現(xiàn)的時(shí)間以及讀長(zhǎng)、通量等特征,分為一代測(cè)序、二代測(cè)序、三代測(cè)序。下面的這些測(cè)序方法,你知道嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!一、一代測(cè)序一代測(cè)序技術(shù),也被稱為Sanger測(cè)序。其利用了雙脫氧核苷酸會(huì)終止PCR的原理。比如:一條序列為ATCGCTA,我們進(jìn)行3次的雙脫氧核苷酸,第一次加...
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由于二代測(cè)序讀長(zhǎng)的限制,不可能一下將一個(gè)很長(zhǎng)的基因序列測(cè)通,因此需要先將長(zhǎng)基因序列隨機(jī)片段化成小片段,這樣的話,這些片段就可以覆蓋整個(gè)基因組。所以需要構(gòu)建文庫(kù)。一、文庫(kù)構(gòu)建的步驟文庫(kù)構(gòu)建大致步驟類(lèi)似,但是各有各自du特的點(diǎn),例如,RNAseq里miRNA,lncRNA,mRNA方法各有差異,具體方法以后有機(jī)會(huì)再補(bǔ)充。這里以Illumina的PE文庫(kù)為例,其流程圖如下圖。二、文庫(kù)構(gòu)建詳細(xì)步驟(1)DNA片段化(FragmentDNA)使用超聲、酶或者加熱的方式將DNA樣品打碎成...
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NGS即Next-generationsequencing,又叫第二代測(cè)序技術(shù)或者高通量測(cè)序技術(shù)或者下一代測(cè)序技術(shù)。文庫(kù)是DNA/RNA樣本在測(cè)序前做的一系列準(zhǔn)備,因?yàn)樵嫉暮怂針颖緹o(wú)法直接用于測(cè)序,只有經(jīng)過(guò)處理的樣本才能滿足測(cè)序平臺(tái)的要求,比如在DNA樣本兩端添加測(cè)序bi備的接頭;樣本量不足時(shí),可以通過(guò)PCR擴(kuò)增達(dá)到上機(jī)的要求等。NGS測(cè)序?yàn)槭裁葱枰膸?kù)構(gòu)建?讓我們一起來(lái)看看吧!一、DNA文庫(kù)構(gòu)建的內(nèi)容(1)片段化及末端修復(fù)(2)加接頭(3)PCR注意:此處忽略磁珠純化的步...
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