技術(shù)文章
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免疫組化雙染技術(shù)是常用的免疫組化方法之一,它可以通過使用兩種不同種屬的一抗、兩種不同種屬的二抗系統(tǒng)和不同顏色的顯色系統(tǒng),同時(shí)檢測(cè)組織切片中兩種或多種抗原的表達(dá)情況。那么,目前常用的雙染顯色系統(tǒng)有什么呢?讓我們一起來看看吧!一、辣根過氧化物酶(HRP)檢測(cè)系統(tǒng)辣根過氧化物酶(HRP)是一種能將過氧化氫(H2O2)分解為氧氣(O2)和水(H2O)的過氧化物酶。HRP可以使用DAB作為氫供體,H2O2作為底物,最終產(chǎn)生棕黃色的抗原-抗體結(jié)合的產(chǎn)物。二、堿性磷酸酶(AP)檢測(cè)系統(tǒng)DA...
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PCR作為分子生物學(xué)中常用的技術(shù)之一,目的是通過引物的作用擴(kuò)增DNA序列。那PCR引物設(shè)計(jì)的時(shí)候,應(yīng)該注意哪些問題呢?一、引物設(shè)計(jì)區(qū)域:最好在模板cDNA的保守區(qū)內(nèi)DNA序列的保守區(qū)是通過物種間相似序列的比較確定的。在NCBI上搜索不同物種的同一基因,通過序列分析軟件(比如DNAman)比對(duì)(Alignment),各基因相同的序列就是該基因的保守區(qū)。二、引物設(shè)計(jì)長(zhǎng)度:15~30bp最you引物長(zhǎng)度(primerlength)常用的是18~27bp,但不應(yīng)大于38,因?yàn)檫^長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)...
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一、什么是胎牛血清?胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分,不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)至關(guān)重要的營(yíng)養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長(zhǎng)因子對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的維持和生長(zhǎng)至關(guān)重要。FBS還含有多種小分子,如氨基酸、糖、脂質(zhì)和激素。FBS應(yīng)用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細(xì)胞培養(yǎng)中,其濃度高達(dá)20%甚至更高,它提供許多促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖的必需營(yíng)養(yǎng)素和生長(zhǎng)因子。然而,需要注意的是,人類細(xì)胞培養(yǎng)物中的FBS可能會(huì)引入研究成果。...
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購(gòu)買血清后,在使用的過程中,會(huì)遇到這樣那樣的問題,如何處理呢?讓我們一起來看看吧!一、血清保存的最好方法?建議血清最好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶,建議無菌分裝于適當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)冷凍備用。二、如何解凍血清,才能保證其質(zhì)量不會(huì)受損?建議將血清從冷凍箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解凍,然后在室溫下全融,解凍過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。三、為什么血清在解凍后會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀?應(yīng)該怎樣處理?血清中絮狀沉淀產(chǎn)生的原因有很多,其中最pu遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致,而血纖維蛋...
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胎牛血清(FBS)是最chang用的血清添加劑,因?yàn)樗缓L(zhǎng)因子、蛋白和大分子。盡管無血清和非動(dòng)物來源的培養(yǎng)基也逐漸走紅,但許多細(xì)胞系未必適用,并且存在費(fèi)用較高和生長(zhǎng)較慢等缺點(diǎn)。那么,研究人員在評(píng)估FBS的質(zhì)量時(shí),需要注意些什么呢?目前,市場(chǎng)上存在著不同等級(jí)的FBS。由于FBS關(guān)乎細(xì)胞活力和實(shí)驗(yàn)重復(fù)性等重要的參數(shù),故在質(zhì)量方面是絕對(duì)不能含糊的。讓我們一起來看看哪些方面是需要注意的吧!一、可追溯性對(duì)于科學(xué)家而言,最大的風(fēng)險(xiǎn)也許是FBS的純度大打折扣,這可能導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的效...
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