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影響熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)的因素有哪些？

熒光原位雜交是一門新興的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)，是20世紀(jì)80年代末期在原有的放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性原位雜交技術(shù)。那么影響熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)的因素有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、固定液的選擇及固定時(shí)間①石蠟組織建議用10%中性緩沖福爾馬林固定12～48h，其它固定液對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能產(chǎn)生一定的影響。②組織標(biāo)本離體后應(yīng)盡快固定，較大標(biāo)本切開固定。如樣本固定不及時(shí)，熒光信號(hào)會(huì)減弱。（尤其環(huán)境溫度較高時(shí)更應(yīng)及時(shí)固定）③固定液體積應(yīng)不少于標(biāo)本體積的10倍，否則固定不...

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流式細(xì)胞周期檢測(cè)的常見問題有哪些？

你知道流式細(xì)胞周期檢測(cè)的常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、樣本制備注意事項(xiàng)1.根據(jù)不同的檢測(cè)細(xì)胞調(diào)整合適的溫度、濕度、酸堿度等培養(yǎng)環(huán)境，注意一定要無菌的環(huán)境培養(yǎng)。2.培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，以對(duì)數(shù)期處理為宜，避免細(xì)胞量過少導(dǎo)致收集細(xì)胞量不足或者細(xì)胞量過多導(dǎo)致細(xì)胞開始大量死亡造成的實(shí)驗(yàn)誤差。3.流式檢測(cè)細(xì)胞周期上機(jī)檢測(cè)所需收集細(xì)胞量較多，收集細(xì)胞時(shí)盡量多收集一些4.流式檢測(cè)對(duì)細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動(dòng)作輕緩，避免過多地?fù)p傷、弄破細(xì)胞。5.本實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動(dòng)作...

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【干貨】一文了解vero細(xì)胞培養(yǎng)全流程

Vero細(xì)胞系是連續(xù)非整倍體細(xì)胞，連續(xù)細(xì)胞系可以經(jīng)過多次分裂而不衰老，非整倍體是指細(xì)胞中的染色體數(shù)目與通常的不同。與其它普通哺乳動(dòng)物細(xì)胞不同，Vero細(xì)胞還有干擾素分泌缺陷的特點(diǎn)，當(dāng)被病毒感染時(shí)，它不能分泌干擾素，但它仍然具有α/β-干擾素的受體，所以對(duì)于其它來源的干擾素仍有正常的反應(yīng)。一、基本信息細(xì)胞名稱：Vero非洲綠猴腎細(xì)胞細(xì)胞別稱：VERO;Verdareno細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)組織來源：正常腎培養(yǎng)基：MEM+10%FBS+1%PS生長(zhǎng)條件：①氣相：...

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原代細(xì)胞培養(yǎng)的分離注意事項(xiàng)有什么？

分離是原代細(xì)胞培養(yǎng)的重要步驟之一，那么你知道原代細(xì)胞培養(yǎng)的分離注意事項(xiàng)有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、組織塊培養(yǎng)法1.組織塊接種后的前3天，在觀察和移動(dòng)的過程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動(dòng)和振動(dòng)，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會(huì)脫落飄起。2.加入的培養(yǎng)液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來。3.當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞，它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會(huì)影響原代細(xì)胞的生長(zhǎng)。4.為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上，可以在種植前...

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原代細(xì)胞取材的注意事項(xiàng)有哪些？

取材作為原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中至關(guān)重要的一步，那么原代細(xì)胞取材的注意事項(xiàng)有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、皮膚和粘膜主要取皮片，面積一般2~4平方厘米。二、內(nèi)臟和實(shí)體瘤1.無菌環(huán)境；2.熟悉所需組織的類型和部位；3.要避開破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去除混雜的結(jié)締組織。三、血液細(xì)胞一般多抽取靜脈外周血，或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、胸腺、淋巴結(jié)等)分離細(xì)胞，取材時(shí)應(yīng)注意抗凝。四、骨髓、羊水、胸/腹水細(xì)胞嚴(yán)格無菌，注意抗凝，還要盡快分離培養(yǎng)，離心后，用無鈣、鎂PBS洗兩次，再...

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