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PCR引物設(shè)計(jì)的關(guān)鍵點(diǎn)有哪些？

PCR引物是人工合成的一段寡聚核苷酸。引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，因此，PCR的首要任務(wù)就是引物設(shè)計(jì)。那么你知道PCR引物設(shè)計(jì)的關(guān)鍵點(diǎn)有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、引物最好在模板cDNA的保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)DNA序列的保守區(qū)是通過(guò)物種間相似序列的比較確定的。在NCBI上搜索不同物種的同一基因，通過(guò)序列分析軟件（比如DNAman）比對(duì)（Alignment），各基因相同的序列就是該基因的保守區(qū)。二、引物長(zhǎng)度一般在15~30堿基之間引物長(zhǎng)度（primerlength）常用的是18-...

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瓊脂糖核酸電泳，選擇紫外還是藍(lán)光？

DNA分子是一種自身不會(huì)發(fā)出熒光的大分子，需要相應(yīng)的核酸分子染料結(jié)合到DNA分子的大溝處，通過(guò)激發(fā)光激發(fā)DNA–核酸染料復(fù)合物，復(fù)合物會(huì)發(fā)出一束強(qiáng)熒光，通過(guò)相應(yīng)的濾光片過(guò)濾得到單波長(zhǎng)的發(fā)射光，通過(guò)照相機(jī)或者肉眼捕獲就能夠檢測(cè)到相應(yīng)的DNA分子。那么瓊脂糖核酸電泳要選擇紫外還是藍(lán)光呢？讓我們一起來(lái)看看吧！從核酸電泳發(fā)展至今，絕大多數(shù)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室選擇溴化乙錠（EtBr，也簡(jiǎn)稱EB）作為核酸分子染料，由于EB的光譜特性，又不得不選擇紫外光作為激發(fā)光。EB分子因其分子量較小，容...

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細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生物反應(yīng)器有哪些？

懸浮細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器是生物工程中一項(xiàng)重要的技術(shù)手段，它廣泛應(yīng)用于生物制藥、生物燃料以及其他生物工藝過(guò)程中。不同類型的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器在培養(yǎng)條件、操作方式以及設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)上有所不同，充分發(fā)揮著各自的優(yōu)勢(shì)。那么細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生物反應(yīng)器都有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、攪拌罐反應(yīng)器攪拌罐反應(yīng)器是最常見(jiàn)的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器之一。它通過(guò)機(jī)械攪拌的方式保持培養(yǎng)物中的細(xì)胞在懸浮狀態(tài)，并提供足夠的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供給細(xì)胞生長(zhǎng)。攪拌罐反應(yīng)器的結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單，易于操作和維護(hù)。但是，攪拌對(duì)細(xì)胞...

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怎樣選擇細(xì)胞培養(yǎng)板？

細(xì)胞培養(yǎng)板是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的重要工具，選擇適合的細(xì)胞培養(yǎng)板對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有重要影響。那么我們?cè)撛趺催x擇細(xì)胞培養(yǎng)板呢？讓我們一起來(lái)看看吧！1.培養(yǎng)板材質(zhì)：細(xì)胞培養(yǎng)板的材質(zhì)是一個(gè)重要的考慮因素。目前市場(chǎng)上主要有塑料和玻璃兩種材質(zhì)的培養(yǎng)板。塑料培養(yǎng)板價(jià)格較低且易于使用，而玻璃培養(yǎng)板具有更好的透明度和耐高溫的特性。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，可以選擇適合的材質(zhì)。2.表面涂層：細(xì)胞培養(yǎng)板的表面涂層可以影響細(xì)胞黏附和增殖。常用的涂層包括凝膠體、膠原蛋白、明膠等。例如，凝膠體涂層可以增加細(xì)胞對(duì)...

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蛋白質(zhì)凝膠電泳的原理是什么？有何注意事項(xiàng)？

你知道蛋白質(zhì)凝膠電泳的原理是什么嗎？有何注意事項(xiàng)？讓我們一起來(lái)看看吧！一、原理將蛋白質(zhì)樣品同離子型去垢劑十二烷基硫酸鈉（SDS)以及硫基乙醇一起加熱，使蛋白質(zhì)變性，多肽鏈內(nèi)部的和肽鏈之間的二硫鍵被還原，肽鏈被打開(kāi)。打開(kāi)的肽鏈考疏水作用與SDS結(jié)合而帶負(fù)電荷，電泳時(shí)在電場(chǎng)作用下，肽鏈在凝膠中向正極遷移。不同的肽鏈由于在遷移時(shí)受到的阻力不同，在遷移過(guò)程中逐漸分開(kāi)，其相對(duì)遷移率與分子量的對(duì)數(shù)間成線性關(guān)系。二、注意事項(xiàng)1.由于與凝膠聚合有關(guān)的硅橡膠稱、玻璃板表面不光滑潔凈，在電泳時(shí)會(huì)...

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