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ELISA試劑盒的原理是什么？

你知道ELISA試劑盒的原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)用于IgG定量測定的文章，使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法。Elisa試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法，例如:Elisa檢測試劑盒、ElisaKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，Elisa生物試驗(yàn)...

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ELISA檢測方法有哪些？

根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀及檢測的具備條件的不同，所使用的檢測方法也不同，那么ELISA檢測方法有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、雙抗體夾心法測抗原雙抗體夾心法是將特異性抗體結(jié)合到固相載體上形成固相抗體，然后和待測血清中的響應(yīng)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物，洗滌后加酶標(biāo)記抗體，與免疫復(fù)合物中的抗原結(jié)合形成酶標(biāo)抗體-抗原-固相抗體復(fù)合物，加底物顯色，判斷抗原的含量。二、競爭法首先將特異性抗體包被于固相載體表面，經(jīng)洗滌后分成兩組：一組加酶標(biāo)記抗原和被測抗原的混合液，另一組只加酶標(biāo)記抗原，...

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什么是文庫構(gòu)建？

基于NGS測序的諸多優(yōu)點(diǎn)，故此技術(shù)在全球測序市場上占有著絕對的優(yōu)勢位置，而新一代測序（NGS）文庫制備是一體化測序流程中的一個(gè)關(guān)鍵因素，那么什么是文庫構(gòu)建呢？讓我們一起來看看吧！基因文庫是儲存了某種生物的DNA片段的受體菌的集合體。文庫分為儲存全部DNA片段和部分DNA片段，前者叫基因組文庫，后者包括cDNA文庫。文庫構(gòu)建的基礎(chǔ)是將目標(biāo)RNA或DNA制備成可以和測序儀器兼容的形式。從組織或者細(xì)胞中將DNA或RNA提取出來，并通過機(jī)械破碎或者是酶切法對其進(jìn)行片段化。如果前面提取...

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不同動物細(xì)胞或組織的蛋白質(zhì)抽提步驟是怎樣的？

你知道不同動物細(xì)胞或組織的蛋白質(zhì)抽提步驟是怎樣的嗎？讓我們一起來看看吧！一、培養(yǎng)的貼壁動物細(xì)胞的蛋白質(zhì)抽提步驟1.從貼壁細(xì)胞培養(yǎng)瓶中小心傾去培養(yǎng)液。2.預(yù)冷的PBS清洗貼壁的細(xì)胞2次，小心傾去PBS。3.配置含抑制劑的蛋白質(zhì)抽提試劑（1ml抽提試劑中加入5μl蛋白酶抑制劑混合液，5μlPMSF和5μl磷酸酶混合液）。4.細(xì)胞瓶中加入預(yù)冷的含抑制劑的蛋白質(zhì)抽提試劑（107個(gè)細(xì)胞中加入1ml抽提試劑；5×106個(gè)細(xì)胞中加入0.5ml抽提試劑），輕輕搖動5分鐘。5.用一預(yù)冷的橡膠和...

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質(zhì)粒構(gòu)建實(shí)驗(yàn)影響因素有哪些？

質(zhì)粒構(gòu)建是指選定的目的外源基因（DNA）先要經(jīng)過PCR擴(kuò)增。隨后用限制性內(nèi)切酶分別切割載體和外源DNA片段，再使用DNA連接酶將切割后的載體與DNA片段連接，轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞。最后經(jīng)過篩選鑒定出正確的重組克隆質(zhì)粒，實(shí)現(xiàn)目的基因在宿主細(xì)胞內(nèi)的正確表達(dá)。那么質(zhì)粒構(gòu)建實(shí)驗(yàn)影響因素有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、載體的選擇在選擇克隆載體時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：①具有自主復(fù)制能力，拷貝數(shù)高；②攜帶易于篩選的選擇標(biāo)記；③含有多種限制酶的單一識別序列，以供外源基因插入；④載體應(yīng)盡可能?。ǎ?5kb...

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