技術(shù)文章
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類器是一種類似器官但又不是器官的3D細(xì)胞團(tuán)結(jié)構(gòu)。通過在體外培養(yǎng)胚胎或成體干細(xì)胞,讓其增殖分化形成具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能的類似于器官的3D細(xì)胞團(tuán)結(jié)構(gòu)。這些細(xì)胞結(jié)構(gòu)雖然不是真正意義上的人類器官,但能在某些結(jié)構(gòu)和功能上模擬真實器官,因此,把這些微型人造器官命名為:類器官(organoids)。類器官技術(shù)都有哪些應(yīng)用?讓我們一起來看看吧!一、基因編輯技術(shù)在類器官研究中的應(yīng)用CRISPR-Cas9是細(xì)菌和古細(xì)菌在長期演化過程中形成的一種適應(yīng)性免疫防御,可用來對抗入侵的病毒及外源DNA。...
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測序,測的是DNA的序列,也就是測定DNA中脫氧核糖核苷酸的排列順序,它是將DNA化學(xué)信號轉(zhuǎn)變?yōu)橛嬎銠C可處理的數(shù)字信號的一個過程,我們能從這些經(jīng)過科學(xué)計算得出的數(shù)字信號中找尋到生命之間的奧秘。根據(jù)測序技術(shù)出現(xiàn)的時間以及讀長、通量等特征,分為一代測序、二代測序、三代測序。下面的這些測序方法,你知道嗎?讓我們一起來看看吧!一、一代測序一代測序技術(shù),也被稱為Sanger測序。其利用了雙脫氧核苷酸會終止PCR的原理。比如:一條序列為ATCGCTA,我們進(jìn)行3次的雙脫氧核苷酸,第一次加...
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由于二代測序讀長的限制,不可能一下將一個很長的基因序列測通,因此需要先將長基因序列隨機片段化成小片段,這樣的話,這些片段就可以覆蓋整個基因組。所以需要構(gòu)建文庫。一、文庫構(gòu)建的步驟文庫構(gòu)建大致步驟類似,但是各有各自du特的點,例如,RNAseq里miRNA,lncRNA,mRNA方法各有差異,具體方法以后有機會再補充。這里以Illumina的PE文庫為例,其流程圖如下圖。二、文庫構(gòu)建詳細(xì)步驟(1)DNA片段化(FragmentDNA)使用超聲、酶或者加熱的方式將DNA樣品打碎成...
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NGS即Next-generationsequencing,又叫第二代測序技術(shù)或者高通量測序技術(shù)或者下一代測序技術(shù)。文庫是DNA/RNA樣本在測序前做的一系列準(zhǔn)備,因為原始的核酸樣本無法直接用于測序,只有經(jīng)過處理的樣本才能滿足測序平臺的要求,比如在DNA樣本兩端添加測序bi備的接頭;樣本量不足時,可以通過PCR擴增達(dá)到上機的要求等。NGS測序為什么需要文庫構(gòu)建?讓我們一起來看看吧!一、DNA文庫構(gòu)建的內(nèi)容(1)片段化及末端修復(fù)(2)加接頭(3)PCR注意:此處忽略磁珠純化的步...
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凍存細(xì)胞在收到貨后,后續(xù)如何進(jìn)行處理呢?如何復(fù)蘇呢?一文讓你了解清楚!一、收到凍存細(xì)胞如何處理收到凍存細(xì)胞后,請打開包裝箱,檢查箱內(nèi)干冰是否充足,凍存管是否融化,若已經(jīng)融化,請拍照留存,并聯(lián)系客服,若無異常,請及時將凍存管置于超低溫冰箱內(nèi)保存,若長時間不使用,必須在超低溫冰箱內(nèi)過夜后轉(zhuǎn)移至液氮中保存。二、凍存細(xì)胞如何復(fù)蘇取100mm培養(yǎng)皿并做好標(biāo)記,加入預(yù)熱好的12ml完quan培養(yǎng)基,將凍存管放入37℃水浴鍋中,輕輕搖晃凍存管,待細(xì)胞懸液完quan溶解后,轉(zhuǎn)移至安全柜中操作...
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