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蛋白質(zhì)純化都有哪些方法？

蛋白純化是指通過(guò)基因工程技術(shù)將編碼蛋白的核酸序列導(dǎo)入到宿主細(xì)胞，使其大量表達(dá)，再使用適當(dāng)?shù)募兓椒▽⑵湓隗w外純化出來(lái)，從而獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。那么蛋白質(zhì)純化方法都有什么呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、凝膠過(guò)濾層析：根據(jù)分子大小從混合物中分離蛋白質(zhì)，不同蛋白的形狀及分子大小存在差異，在混合物通過(guò)含有填充顆粒的凝膠過(guò)濾層析柱時(shí)，由于各種蛋白的分子大小不同，擴(kuò)散進(jìn)入特定大小孔徑顆粒內(nèi)的能力也各異，大的蛋白分子會(huì)被先洗脫出來(lái)，分子越小越晚洗脫。二、離子交換層析：依據(jù)蛋白表面所...

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傳統(tǒng)流式、全光譜流式和質(zhì)譜流式有什么不同？

流式最早的時(shí)候是從流體力學(xué)發(fā)展而來(lái)的。1738年，瑞士物理學(xué)家、數(shù)學(xué)家丹尼爾·伯努利出版了《流體動(dòng)力學(xué)》。證實(shí)了流體在重力場(chǎng)中流動(dòng)時(shí)能量守恒的原理。這個(gè)原理就是后來(lái)廣泛被用于在流式細(xì)胞儀上實(shí)現(xiàn)高速單細(xì)胞液流的基本原理。并在隨后的兩百年時(shí)間里不斷的演變發(fā)展。那么你知道傳統(tǒng)流式、全光譜流式和質(zhì)譜流式有什么不同嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、傳統(tǒng)流式傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀主要由四部分組成。分別是流動(dòng)室和液流系統(tǒng)；激光源和光學(xué)系統(tǒng)；光電管和檢測(cè)系統(tǒng)；計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)。基本外觀如下：內(nèi)部結(jié)構(gòu)圖大...

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胎牛血清采取什么樣的制備方法合適？

胎牛血清是指從胎牛體內(nèi)采集的血液，并在一定條件下經(jīng)過(guò)處理和加工，得到的一種具有特殊功能和應(yīng)用價(jià)值的生物制品。胎牛血清采取什么樣的制備方法合適？讓我們一起來(lái)看看吧！來(lái)源：胎牛血清的來(lái)源主要是通過(guò)人工飼養(yǎng)的母牛妊娠9-11個(gè)月產(chǎn)下的胎牛。這些胎牛在出生后，血液樣品可以通過(guò)負(fù)壓采集技術(shù)從臍靜脈中采集得到。這一過(guò)程通常在出生后的24-48小時(shí)內(nèi)進(jìn)行，以確保血液中含有足夠的血清成分。制備方法：一、采集血液樣品：使用負(fù)壓采集技術(shù)從胎牛的臍靜脈中采集血液樣品。確保在出生后的24-48小時(shí)內(nèi)...

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細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)的方法、步驟有哪些？

細(xì)胞免疫熒光主要應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)抗原抗體檢測(cè)，適用于細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)。那么細(xì)胞免疫熒光有哪些方法和步驟呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、直接法將標(biāo)記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標(biāo)本上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色，用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體，室溫下干燥后封片、鏡檢。二、間接法（較為常用）如檢查未知抗原，先用已知未標(biāo)記的特異抗體（第一抗體）與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng)，用水洗去未反應(yīng)的抗體，再用標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）與抗原標(biāo)本反應(yīng)，使之形成抗體—抗原—抗體復(fù)合物，再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記抗體，干燥...

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你知道PCR引物設(shè)計(jì)原則是什么嗎？

PCR引物是人工合成的一段寡聚核苷酸。PCR中通常需要兩種引物。一種與感興趣區(qū)域一端的一條DNA模板鏈互補(bǔ)，另—種與感興趣區(qū)域另一端的另一條DNA模板鏈互補(bǔ)。PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，因此，PCR的首要任務(wù)就是引物設(shè)計(jì)。引物設(shè)計(jì)的好壞，直接影響了PCR的結(jié)果。成功的PCR反應(yīng)既要高效，又要特異性擴(kuò)增產(chǎn)物。那么PCR引物設(shè)計(jì)的原則有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！引物設(shè)計(jì)的目的是在兩個(gè)目標(biāo)之間取得平衡：擴(kuò)增特異性和效率。因此，...

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