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PCR引物設(shè)計(jì)，應(yīng)該注意哪些問題？

PCR作為分子生物學(xué)中常用的技術(shù)之一，目的是通過引物的作用擴(kuò)增DNA序列。那PCR引物設(shè)計(jì)的時(shí)候，應(yīng)該注意哪些問題呢？一、引物設(shè)計(jì)區(qū)域：最好在模板cDNA的保守區(qū)內(nèi)DNA序列的保守區(qū)是通過物種間相似序列的比較確定的。在NCBI上搜索不同物種的同一基因，通過序列分析軟件(比如DNAman)比對(Alignment),各基因相同的序列就是該基因的保守區(qū)。二、引物設(shè)計(jì)長度：15~30bp最you引物長度(primerlength)常用的是18~27bp,但不應(yīng)大于38,因?yàn)檫^長會導(dǎo)...

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關(guān)于胎牛血清，你知道多少？

一、什么是胎牛血清？胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分，不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子，但含有大量對細(xì)胞生長至關(guān)重要的營養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長因子對于培養(yǎng)細(xì)胞的維持和生長至關(guān)重要。FBS還含有多種小分子，如氨基酸、糖、脂質(zhì)和激素。FBS應(yīng)用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細(xì)胞培養(yǎng)中，其濃度高達(dá)20%甚至更高，它提供許多促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖的必需營養(yǎng)素和生長因子。然而，需要注意的是，人類細(xì)胞培養(yǎng)物中的FBS可能會引入研究成果。...

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血清使用常見問題，如何處理？

購買血清后，在使用的過程中，會遇到這樣那樣的問題，如何處理呢？讓我們一起來看看吧！一、血清保存的最好方法？建議血清最好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶，建議無菌分裝于適當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)冷凍備用。二、如何解凍血清，才能保證其質(zhì)量不會受損？建議將血清從冷凍箱取出后，置于2℃～8℃冰箱中解凍，然后在室溫下全融，解凍過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。三、為什么血清在解凍后會出現(xiàn)絮狀沉淀？應(yīng)該怎樣處理？血清中絮狀沉淀產(chǎn)生的原因有很多，其中最pu遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致，而血纖維蛋...

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選購胎牛血清需要注意什么？

胎牛血清（FBS）是最chang用的血清添加劑，因?yàn)樗缓L因子、蛋白和大分子。盡管無血清和非動物來源的培養(yǎng)基也逐漸走紅，但許多細(xì)胞系未必適用，并且存在費(fèi)用較高和生長較慢等缺點(diǎn)。那么，研究人員在評估FBS的質(zhì)量時(shí)，需要注意些什么呢？目前，市場上存在著不同等級的FBS。由于FBS關(guān)乎細(xì)胞活力和實(shí)驗(yàn)重復(fù)性等重要的參數(shù)，故在質(zhì)量方面是絕對不能含糊的。讓我們一起來看看哪些方面是需要注意的吧！一、可追溯性對于科學(xué)家而言，最大的風(fēng)險(xiǎn)也許是FBS的純度大打折扣，這可能導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的效...

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分子實(shí)驗(yàn)室的有毒試劑，你知道多少？

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的有毒試劑，你知道多少？一起來看看吧一、DMSO(二甲基亞砜)DMSO，用途廣泛，用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶于水又溶于有機(jī)溶劑的極為重要的非質(zhì)子極性溶劑。對皮膚有極qiang的滲透性，有助于藥物向人體滲透。也可作為農(nóng)藥的添加劑。也是一種十分重要的化學(xué)試劑。DMSO也是一種滲透性保護(hù)劑，能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn)，減少冰晶的形成，減輕自由基對細(xì)胞損害，改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。但是研究表明，DMSO存在...

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