技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2023-829
胎牛血清(FBS)是最chang用的血清添加劑,因?yàn)樗缓L(zhǎng)因子、蛋白和大分子。盡管無血清和非動(dòng)物來源的培養(yǎng)基也逐漸走紅,但許多細(xì)胞系未必適用,并且存在費(fèi)用較高和生長(zhǎng)較慢等缺點(diǎn)。那么,研究人員在評(píng)估FBS的質(zhì)量時(shí),需要注意些什么呢?目前,市場(chǎng)上存在著不同等級(jí)的FBS。由于FBS關(guān)乎細(xì)胞活力和實(shí)驗(yàn)重復(fù)性等重要的參數(shù),故在質(zhì)量方面是絕對(duì)不能含糊的。讓我們一起來看看哪些方面是需要注意的吧!一、可追溯性對(duì)于科學(xué)家而言,最大的風(fēng)險(xiǎn)也許是FBS的純度大打折扣,這可能導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的效...
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2023-828
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的有毒試劑,你知道多少?一起來看看吧一、DMSO(二甲基亞砜)DMSO,用途廣泛,用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶于水又溶于有機(jī)溶劑的極為重要的非質(zhì)子極性溶劑。對(duì)皮膚有極qiang的滲透性,有助于藥物向人體滲透。也可作為農(nóng)藥的添加劑。也是一種十分重要的化學(xué)試劑。DMSO也是一種滲透性保護(hù)劑,能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn),減少冰晶的形成,減輕自由基對(duì)細(xì)胞損害,改變生物膜對(duì)電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。但是研究表明,DMSO存在...
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2023-828
類器是一種類似器官但又不是器官的3D細(xì)胞團(tuán)結(jié)構(gòu)。通過在體外培養(yǎng)胚胎或成體干細(xì)胞,讓其增殖分化形成具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能的類似于器官的3D細(xì)胞團(tuán)結(jié)構(gòu)。這些細(xì)胞結(jié)構(gòu)雖然不是真正意義上的人類器官,但能在某些結(jié)構(gòu)和功能上模擬真實(shí)器官,因此,把這些微型人造器官命名為:類器官(organoids)。類器官技術(shù)都有哪些應(yīng)用?讓我們一起來看看吧!一、基因編輯技術(shù)在類器官研究中的應(yīng)用CRISPR-Cas9是細(xì)菌和古細(xì)菌在長(zhǎng)期演化過程中形成的一種適應(yīng)性免疫防御,可用來對(duì)抗入侵的病毒及外源DNA。...
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2023-825
測(cè)序,測(cè)的是DNA的序列,也就是測(cè)定DNA中脫氧核糖核苷酸的排列順序,它是將DNA化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)橛?jì)算機(jī)可處理的數(shù)字信號(hào)的一個(gè)過程,我們能從這些經(jīng)過科學(xué)計(jì)算得出的數(shù)字信號(hào)中找尋到生命之間的奧秘。根據(jù)測(cè)序技術(shù)出現(xiàn)的時(shí)間以及讀長(zhǎng)、通量等特征,分為一代測(cè)序、二代測(cè)序、三代測(cè)序。下面的這些測(cè)序方法,你知道嗎?讓我們一起來看看吧!一、一代測(cè)序一代測(cè)序技術(shù),也被稱為Sanger測(cè)序。其利用了雙脫氧核苷酸會(huì)終止PCR的原理。比如:一條序列為ATCGCTA,我們進(jìn)行3次的雙脫氧核苷酸,第一次加...
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2023-824
由于二代測(cè)序讀長(zhǎng)的限制,不可能一下將一個(gè)很長(zhǎng)的基因序列測(cè)通,因此需要先將長(zhǎng)基因序列隨機(jī)片段化成小片段,這樣的話,這些片段就可以覆蓋整個(gè)基因組。所以需要構(gòu)建文庫(kù)。一、文庫(kù)構(gòu)建的步驟文庫(kù)構(gòu)建大致步驟類似,但是各有各自du特的點(diǎn),例如,RNAseq里miRNA,lncRNA,mRNA方法各有差異,具體方法以后有機(jī)會(huì)再補(bǔ)充。這里以Illumina的PE文庫(kù)為例,其流程圖如下圖。二、文庫(kù)構(gòu)建詳細(xì)步驟(1)DNA片段化(FragmentDNA)使用超聲、酶或者加熱的方式將DNA樣品打碎成...
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