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如何選擇熒光定量PCR中的對照？

對照的目的是對檢測的各個環(huán)節(jié)進行監(jiān)控，因此我們按照檢測的流程對對照進行梳理。那么我們應該如何選擇熒光定量PCR中的對照呢？讓我們一起來看看吧！一、陽性對照和陰性對照陽性對照和陰性對照是指在相同的處理條件下，比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品，都進行了提取和擴增最終獲得了陽性結(jié)果和陰性結(jié)果。陰陽性對照強調(diào)處理過程與樣品一致，并且有明確的預期結(jié)果。二、擴增對照我們通常說的陽性對照和陰性對照指的是擴增試劑盒中附帶的不需要提取的陽性對照和陰性對照，更準確的定義應該是擴增陽性...

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你知道熒光定量PCR的應用嗎？

熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴增反應體系中加入熒光基團，通過對擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的應用嗎？讓我們一起來看看吧！一、分子生物學研究1.核酸定量分析：對傳染性疾病進行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感，轉(zhuǎn)基因動植物基因拷貝數(shù)的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。2.基因表達差異分析：比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達差...

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你知道細胞凍存的原理和實驗步驟嗎？

細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術(shù)。那么你知道細胞凍存的原理和實驗步驟嗎？讓我們一起來看看吧！原理：將細胞放在-196℃液氮中，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)，減少細胞代謝，理論上儲存時間幾乎是無限的。最佳的冷凍條件是盡可能地降低細胞內(nèi)的晶體形成，減少細胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細胞造成的低溫損傷。上述要求可通過下列方法獲得：1.緩慢冷凍，使細胞內(nèi)水分離開細胞，但不可太慢，以避免冰晶形成；2.用親水的低溫保護劑排除水分；3.在盡可能低的溫度下保存細胞，降低高濃度鹽對冰中蛋白質(zhì)變性的...

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細胞凍存有何注意事項？

細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術(shù)。原理是將細胞放在-196℃液氮中，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)，減少細胞代謝，理論上儲存時間幾乎是無限的。那么細胞凍存有何注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、DMS0稀釋時會釋放大量熱量，不能直接加到細胞液中，須事先配制，且DMSO必須是細胞培養(yǎng)級別的；二、緩慢冷凍，細胞逐步脫水，不會因產(chǎn)生大的冰晶而受到損害；三、選擇細胞生長良好、密度約為80-90%、活力達90%以上的細胞凍存；四、凍存時細胞密度少于5X105個活細胞/mL時，很難成功復蘇；五、...

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如何區(qū)分各種PCR技術(shù)？

PCR是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術(shù)，PCR技術(shù)有很多，那么我們應該如何區(qū)分各種PCR技術(shù)呢？讓我們一起來看看吧！一、普通PCRPCR是普通PCR，以雙鏈DNA為模板，以dNTP為底物，特異性地擴增雙鏈DNA。然后采用瓊脂糖凝膠電泳對產(chǎn)物進行檢測，只能做定性分析。二、實時熒光定量PCRqPCR和Real-timePCR是實時熒光定量PCR，以cDNA為模板，以dNTP為底物，對擴增出的DNA進行定量分析。實時熒光定量PCR常用的方法：水解探針法和熒光染料法...

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