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凱杰qiagen質(zhì)粒提取試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

更新時(shí)間:2024-08-28點(diǎn)擊次數(shù):1624

一、凱杰Qiagen介紹

QIAGEN是一家專業(yè)化致力于生物分子樣品制備解決方案的跨國(guó)經(jīng)營(yíng)企業(yè),總部位于德國(guó)。1984年,QIAGEN在德國(guó)成立,1996年在美國(guó)紐約納斯達(dá)克上市。QIAGEN擁有超過(guò)1000項(xiàng)zhuanli和認(rèn)可證明,在18個(gè)國(guó)家設(shè)立了分公司,代理商服務(wù)國(guó)超過(guò)40個(gè),在全球有超過(guò)400000的用戶。QIAGEN提供的產(chǎn)品超過(guò)500類,包括各種試劑,耗材和自動(dòng)化純化工作站。這些產(chǎn)品用于樣品采集,穩(wěn)定,核酸或蛋白的分離,純化和檢測(cè)中,不僅廣泛的應(yīng)用于科研領(lǐng)域的各個(gè)方面,在生物技術(shù),制藥,法醫(yī)研究,食品安全檢測(cè),畜牧業(yè)分子診斷領(lǐng)域也得到了廣泛的應(yīng)用。QIAGEN產(chǎn)品的zuo越品質(zhì)和在應(yīng)用中的出色表現(xiàn)使得其成為樣品處理中標(biāo)準(zhǔn)的代名詞。

二、凱杰qiagen質(zhì)粒提取試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

?Qiagen質(zhì)粒提取試?劑盒的實(shí)驗(yàn)原理?主要基于細(xì)菌的培養(yǎng)、收獲和裂解,以及隨后通過(guò)特定的緩沖液和操作步驟來(lái)純化質(zhì)粒DNA。這個(gè)過(guò)程涉及幾個(gè)關(guān)鍵步驟,包括細(xì)菌的培養(yǎng)、收獲、裂解,以及質(zhì)粒DNA的純化。

1.  ?細(xì)菌的培養(yǎng)?:首先,從瓊脂平板上挑取一個(gè)單菌落,接種到含有適當(dāng)抗生素的LB液體培養(yǎng)基中,并在特定條件下培養(yǎng),以便質(zhì)粒DNA能夠自主復(fù)制。

2. ?細(xì)菌的收獲和裂解?:通過(guò)離心收集細(xì)菌,然后使用特定的緩沖液(如Buffer P1)重懸細(xì)菌。接著添加Buffer P2并劇烈晃動(dòng)以裂解細(xì)菌,這一步中SDS(十二烷基硫酸鈉)起到變性蛋白質(zhì)的作用,促進(jìn)細(xì)胞壁的裂解。隨后加入冰浴的Buffer P3,通過(guò)離心和過(guò)濾步驟去除細(xì)胞碎片和未裂解的細(xì)胞。 

3. ?質(zhì)粒DNA的純化?:經(jīng)過(guò)上述步驟后,質(zhì)粒DNA被釋放到溶液中。通過(guò)使用QIAGEN-tip進(jìn)行進(jìn)一步的純化,利用特定的緩沖液(如Buffer QBT、Buffer QCBuffer QN)進(jìn)行洗滌和洗脫,最終得到較為純凈的質(zhì)粒DNA。

這個(gè)過(guò)程的關(guān)鍵在于使用特定的緩沖液和操作步驟來(lái)最大限度地提取質(zhì)粒DNA,同時(shí)去除雜質(zhì),如蛋白質(zhì)和基因組DNA,以確保獲得高質(zhì)量的質(zhì)粒產(chǎn)品。此外,通過(guò)加入異丙醇和乙醇進(jìn)行沉淀和清洗,進(jìn)一步提高了質(zhì)粒DNA的純度和濃度。

image.png

?

三、凱杰qiagen質(zhì)粒提取試劑盒目錄表

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

12362

EndoFree Plasmid Maxi Kit (10)

10T

12381

EndoFree Plasmid Mega Kit (5)

5T

12391

EndoFree Plasmid Giga Kit (5)

5T



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