А√天堂资源中文,免费看大片的播放器,51国产黑色丝袜高跟鞋,国产精品无码无卡毛片不卡视

15522676233
TECHNICAL ARTICLES

技術(shù)文章

當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章逆轉(zhuǎn)錄酶怎么選?

逆轉(zhuǎn)錄酶怎么選?

更新時(shí)間:2023-12-15點(diǎn)擊次數(shù):1772
  逆轉(zhuǎn)錄酶(Reverse Transcriptase)是一種用于從RNA模板生成互補(bǔ)DNA(cDNA)的酶,是cDNA合成和RT-qPCR反應(yīng)中的核心酶,其合成的cDNA可以直接作為PCR,qPCR,LAMP和測(cè)序等檢測(cè)的模板。那么你知道該如何選擇逆轉(zhuǎn)錄酶嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
  一、逆轉(zhuǎn)錄酶活性
  逆轉(zhuǎn)錄酶主要包括以下三種活性:
  ①逆轉(zhuǎn)錄活性:以RNA為模板,催化dNTP聚合,生成DNA-RNA雜合雙鏈。
 ?、赗Nase H活性:水解雜合雙鏈中的RNA,得到與RNA互補(bǔ)的DNA單鏈(cDNA)。
 ?、跠NA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性:以cDNA單鏈為模板,以dNTP為底物,再合成雙鏈DNA。
  二、決定最佳逆轉(zhuǎn)錄酶的幾個(gè)關(guān)鍵重要特性
  1.熱穩(wěn)定性
  耐高溫能力是cDNA合成的一個(gè)重要方面,因?yàn)楦邷赜兄谑咕哂袕?qiáng)二級(jí)結(jié)構(gòu)和/或高GC含量的RNA變性,從而實(shí)現(xiàn)全長(zhǎng)cDNA合成和更高產(chǎn)量。
  野生型MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶在37°C下表現(xiàn)最佳,而加工改造后的熱穩(wěn)定性MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶可以承受高達(dá)55°C的溫度,而不會(huì)對(duì)逆轉(zhuǎn)錄效率產(chǎn)生負(fù)面影響。
  2.RNase H活性
  RNase H(核糖核酸酶H)是一種切割并降解RNA-DNA雜交鏈中RNA鏈的酶,同時(shí)可以保持DNA鏈的完整。
  如果逆轉(zhuǎn)錄酶的RNA酶H活性過(guò)高,則會(huì)導(dǎo)致RNA模板的過(guò)度降解,引起cDNA合成不完整或效率低下。具有低RNase H活性的逆轉(zhuǎn)錄酶可以最大限度地減少反應(yīng)中RNA分子的非特異性降解,提高cDNA合成的特異性和保真度。
  由于RNA模板在全長(zhǎng)逆轉(zhuǎn)錄完成之前可能被降解,RNase H活性是長(zhǎng)片段cDNA合成過(guò)程中需要規(guī)避的因素。RNase H活性還可能會(huì)與逆轉(zhuǎn)錄酶中的活性聚合酶競(jìng)爭(zhēng)從而降低逆轉(zhuǎn)錄效率。為了更好地合成cDNA,通過(guò)在逆轉(zhuǎn)錄酶的RNase H結(jié)構(gòu)域中引入突變,逆轉(zhuǎn)錄酶的RNase H活性降低甚至完q消除。這種突變常??梢栽黾娱L(zhǎng)鏈cDNAs的產(chǎn)量,促進(jìn)其合成。
  3.持續(xù)合成能力
  持續(xù)合成能力是指在酶的單個(gè)結(jié)合事件中摻入的核苷酸數(shù)量。持續(xù)合成能力強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)錄酶可以在更短的反應(yīng)時(shí)間內(nèi)合成更長(zhǎng)的cDNA鏈。大多數(shù)經(jīng)過(guò)改造的逆轉(zhuǎn)錄酶具有更強(qiáng)的合成能力(比野生型MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶高65倍)。
  更多有關(guān)逆轉(zhuǎn)錄酶的選擇問(wèn)題,請(qǐng)聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司。
聯(lián)系方式

15522676233

(全國(guó)服務(wù)熱線)

北京市海淀區(qū)溫泉鎮(zhèn)創(chuàng)客小鎮(zhèn)社區(qū)配套商業(yè)樓

3007606172@qq.com

關(guān)注我們

Copyright © 2025北京百奧創(chuàng)新科技有限公司 All Rights Reserved   工信部備案號(hào):京ICP備17019404號(hào)-2

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)   管理登錄   sitemap.xml

關(guān)注

聯(lián)系
聯(lián)系
頂部
国产午夜福利视频在线观看| 九九视频在线观看视频6| 少妇和邻居做不戴套视频| 精品成品国色天香卡一卡二卡三 | 国偷自产AV一区二区三区| 十九岁日本完整免费完整版| 野花免费观看高清视频6| 人人妻人人澡人人爽欧美精品 | 97人妻人人揉人人躁人人| 久久www免费人成精品| 99久久亚洲精品无码毛片| 国产精品岛国久久久久| 麻豆精品久久久久久久99蜜桃| 又长又粗又爽又黄少妇毛片 | 欧美精产国品一二三产品| 真人做人60分钟啪啪免费看| gogogo日本免费观看电视| 后入内射无码人妻一区| 国产超碰人人做人人爽AV| bdb14黑人巨大视频| 亚洲AV无码成人专区| 日本最大但人文艺术第一组 | 少妇粉嫩小泬喷水视频| 中文字幕无码乱人伦| 日韩夜夜高潮夜夜爽无码| 国产av国产精品白丝jk制服| 人妻在卧室被老板疯狂进入| 欧美精品久久96人妻无码| 亚洲精品无码mv在线观看| 最近2019好看的中文字幕免费| 初女模被破流血视频| 国产精品成人一区二区三区| 亚洲成av人片天堂网无码| 无遮无挡爽爽免费毛片| 久久夜色精品国产亚洲AV动态图| 漂亮人妻被中出中文字幕久久 | 被强行灌满精子的少妇| 欧美老肥妇做爰bbww| 一本色道无码道DVD在线观看| 朋友新婚人妻无套| 亚洲中文字幕无码一区在线|