А√天堂资源中文,免费看大片的播放器,51国产黑色丝袜高跟鞋,国产精品无码无卡毛片不卡视

15522676233
TECHNICAL ARTICLES

技術(shù)文章

當前位置:首頁技術(shù)文章免疫細胞(ICC)實驗常見問題有哪些?

免疫細胞(ICC)實驗常見問題有哪些?

更新時間:2023-10-20點擊次數(shù):1635

免疫細胞化學(xué) (ICC) 是一種使用熒光抗體或染料來檢測細胞內(nèi)靶抗原的技術(shù)。那么免疫細胞(ICC)實驗常見問題有哪些?讓我們一起來看看吧!

一、熒光信號弱

1. 樣品質(zhì)量

選用新鮮制備的樣本以及適當?shù)谋3謼l件。

2. 靶標豐度低

適當提高一抗?jié)舛取?/span>

選擇熒光強度更強的二抗。

3. 固定方法不當

甲醛和蛋白的氨基通過共價鍵結(jié)合,可能會遮蓋抗原表位,導(dǎo)致靶表位信號減弱。建議調(diào)整抗原修復(fù)方法或固定方法。

多聚甲醛會與GFP熒光蛋白發(fā)生醛化反應(yīng),導(dǎo)致信號減弱。

檢測膜蛋白一般不建議使用甲醇或丙酮固定,有機溶劑能夠破壞膜結(jié)構(gòu)。

4. 透化方法不當

檢查靶標蛋白表達位置,胞內(nèi)蛋白需要透化處理。

膜蛋白需要考慮所檢測靶表位位于膜內(nèi)還是膜外,膜外則不需要透化。

5. 信號放大不夠

如果檢測靶點是低豐度蛋白.信號弱可能是由于信號放大不足導(dǎo)致的,可以使用Invitrogen SuperBoost 酪胺信號放大技術(shù),進一步增強信號,實現(xiàn)低豐度,難以檢測蛋白的檢測。

二、背景太高

1. 封閉不足

1)選用二抗種屬來源的血清封閉。

2)選用鏈霉親和素/生物素系統(tǒng),需要用鏈霉親和素封閉內(nèi)源的生物鏈酶。

3)選用HRP系統(tǒng),需要使用過氧化氫等商業(yè)化試劑盒去活化內(nèi)源性HRP

4)選用AP系統(tǒng),需要使用左旋咪唑等商業(yè)化試劑去活化內(nèi)源性磷酸酶。

2. 一抗

一抗?jié)舛冗^高,減少用量

3. 二抗

1)設(shè)置無一抗對照,幫助確認背景是否來源二抗。

2)二抗?jié)舛冗^高,減少用量。

3)抗體凝聚,使用二抗前離心去掉抗體凝聚物。

4)使用高交叉吸附的Alexa Fluor Plus二抗,信噪比比Alexa Fluor提高4-5倍。

4. 自發(fā)熒光

1)設(shè)置自發(fā)熒光對照,確定是否自發(fā)熒光。

2)固定劑如醛類和氨基共價結(jié)合導(dǎo)致的自發(fā)熒光,可用硼氫化na去除。

3)增加固定劑的漂洗次數(shù)。

4)避開背景高的波段,選用背景較低的波段檢測。

更多有關(guān)免疫細胞(ICC)實驗常見問題,請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司:


聯(lián)系方式

15522676233

(全國服務(wù)熱線)

北京市海淀區(qū)溫泉鎮(zhèn)創(chuàng)客小鎮(zhèn)社區(qū)配套商業(yè)樓

3007606172@qq.com

關(guān)注我們

Copyright © 2025北京百奧創(chuàng)新科技有限公司 All Rights Reserved   工信部備案號:京ICP備17019404號-2

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)   管理登錄   sitemap.xml

關(guān)注

聯(lián)系
聯(lián)系
頂部
jizz国产精品| 亚洲AV无码不卡| 亚洲精品国产成人| 金瓶梅1-5电影免费观看在线| 真实单亲乱l仑对白视频| 亚洲最大成人网站| 丰满少妇69激情啪啪无| 欧美三级乱人伦电影| 男人用嘴添女人私密视频| 精品视频一区二区三三区四区| 中文字幕在线精品视频入口一区| 精品无码三级在线观看视频| 亚洲av日韩av永久无码久久| 色偷偷偷久久伊人大杳蕉| 日本成本人片无码免费视频网站 | 欧美激情精品久久| 国产精品狼人久久久久影院| 人妻出轨和黑人疯狂做国产人| 竹菊成av人无码亚洲成av无码 | 亚洲天堂2017无码| 国产乱码精品一区二区三区四川人| 久久国产精品波多野结衣av| 国产乱码卡二卡三卡4| 亚洲精品无码高潮喷水a片软| 男人多人做人爱的视频| 日韩视频中文字幕精品偷拍| 任你躁x7x7x7x7在线观看| 99久久99这里只有免费费精品| 国产普通话对白刺激| 国产av无码免费一区二区| 天下第一日本www视频| 最近的2019中文字幕国语在线| gogo西西人体做爰大胆视频图| 国产欧美成人一区二区a片| av国産精品毛片一区二区三区| 激情无码人妻又粗又大| 丰满熟妇人妻av无码区| 新狼窝色AV性久久久久久| 国产精品丝袜久久久久久不卡| 中文字幕精品久久久乱码乱码| 国产亚洲欧美日韩俺去了|