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試劑盒提取的原則

更新時(shí)間:2018-07-30點(diǎn)擊次數(shù):2453
   試劑盒提取的原則
  試劑盒的用途:用固相化的、已標(biāo)記的餌蛋白或標(biāo)簽蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),從細(xì)胞裂解液中釣出與之有相互作用的蛋白質(zhì)。酵母雙雜交后,驗(yàn)證已知的“誘餌”蛋白與釣出蛋白或已純化的相關(guān)蛋白間的相互作用關(guān)系。從體外轉(zhuǎn)錄或翻譯體系中檢測(cè)出蛋白質(zhì)相互作用。
  試劑盒特點(diǎn):提供了可用于發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)相互作用的一套完整、易用、經(jīng)濟(jì)的方案。用普通的試驗(yàn)儀器和試劑(如離心機(jī)、Mini-Gel、蛋白質(zhì)染色)即可完成整個(gè)實(shí)驗(yàn)。適用于單個(gè)或多個(gè)樣品。靈活的“誘餌-捕獲”方式,鹽離子、變性劑濃度可調(diào),對(duì)于弱的蛋白質(zhì)相互作用也適用。一天之內(nèi)“捕獲”和檢測(cè)可能與“誘餌”蛋白相結(jié)合的蛋白。回收相互作用的蛋白質(zhì)復(fù)合物。
  試劑盒配有進(jìn)行分析或測(cè)定所必需的全部試劑的成套用品,操作方便,而且排除的人為配置藥品的誤差,因?yàn)槿吭噭┒际浅商壮霈F(xiàn),使操作更加標(biāo)準(zhǔn),不會(huì)有浪費(fèi)的現(xiàn)象。
  試劑盒提取的原則
  1、保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性(因?yàn)檫z傳信息全部?jī)?chǔ)存在核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)中,故完整的一級(jí)結(jié)構(gòu)是保證核酸結(jié)構(gòu)與功能研究的基層)。
  2、排除其它分子(如蛋白質(zhì)、多糖,、脂類、有機(jī)溶劑等)的污染,使下游試驗(yàn)順利進(jìn)行。
  試劑盒提取的原理和方法
  DNA與組蛋白構(gòu)成核小體,核小體纏繞成中空的螺旋管狀結(jié)構(gòu),即染色絲,染色絲再與許多非組蛋白形成染色體。染色體存在于細(xì)胞核中,
  外有核膜及胞膜。從組織中提取DNA必須先將組織分散成單個(gè)細(xì)胞,然后破碎胞膜及核膜,使染色體釋放出來(lái),同時(shí)去除與DNA結(jié)合的組蛋白及非組蛋白。
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